实验原理
本实验是利用还原性糖与斐林试剂发生颜色反应的特性,来检测生物组织中是否含有还原糖 。还原糖是指具有还原性的糖类 。在糖类中,分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的二塘都具有还原性 。如葡糖糖,果糖,半乳糖等 。
三、材料用具
本实验很重要的为材料的选择和斐林试剂配制 。
1.材料的选择:要鉴定生物组织样液中的还原糖,要选择适当的材料,本实验理想的最常见的材料是苹果和梨 。(应去皮去核,材料本身为白色或近于白色,避免干扰实验 。)我选择的是苹果匀浆 。
2.斐林试剂:斐林试剂是由0.1g/ml的NaOH溶液和0.05g/ml的CuSO4溶液等量混合均匀配成的 。NaOH与CuSO4反应生成浅蓝色Cu(OH)2沉淀,新生成的Cu(OH)2与还原糖在水浴加热的 情况下能生成砖红色的Cu2O沉淀 。(斐林试剂必须现配现用)
四、 实验步骤
1. 取2支大小相同的洁净试管,分别加入2ml苹果组织匀浆和蒸馏水,并观察颜色(先做对照水 。用滴管吸倒入量筒再倒入试管 。)
【检测还原糖的原理是什么,兰艾农法测定还原糖的原理?】2.配制斐林试剂:(再取第3支试管)取一只试管,向试管中先加入2ml的NaOH,再加入2ml的CuSO4 。轻微震荡混合均匀 。
3.向苹果组织匀浆和蒸馏水中各加入2ml斐林试剂 。
4.水浴加热2分钟,观察两支试管中液体的颜色变化 。(水温50-65度,可提前准备热水 。)(试管夹夹试管,朝没人处 。加有苹果组织匀浆中的溶液颜色开始是蓝色,然后慢慢变成棕绿色,最后成砖红色 。)
五、实验现象
这个实验就证明了苹果组织匀浆中含有还原糖 。还原糖将蓝色的Cu(OH)2还原成砖红色Cu2O沉淀 。而蒸馏水中没有还原糖,所以溶液颜色依然是蓝色 。
六、 实验结论
由此实验我们可得出的实验结论为:生物材料苹果中含有还原糖 。
七、 实验注意事项
1. 材料选择应为白色或近白色,避免干扰 。
2. 斐林试剂现配现用
3. 水浴加热试管不准触及烧杯底部,以防受热不均匀 。
八、 实验思考以及与的生活联系
1. 还有哪种办法可以鉴定还原糖的存在?
还原糖+班氏试剂---砖红色沉淀;还原糖+银氨溶液---银镜反应
2.如果怀疑某人为糖尿病患者,如何进行证明?
如果为糖尿病患者,那么此人的尿液中含有葡萄糖,可以采用葡萄糖在加热的情况下与斐林试剂或者班氏试剂生成砖红色的沉淀来鉴定或者与银氨溶液发生银镜反应来鉴定 。
文章插图
兰艾农法测定还原糖的原理?
利用还原糖的还原性将菲林试剂中的Cu2+还原为Cu2O,Cu2O再与亚铁氰化钾反应生成可溶性化合物,稍微过量的糖将次甲基蓝还原为无色化合物,因此可用次甲基蓝作为终点指示剂,无色次甲基蓝隐色体很容易被O2所氧化,所以要沸腾排除O2 。
整个过程在沸腾条件下进行,溶液由蓝色变为无色即为滴定终点
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