实时荧光定量PCR与普通PCR的区别是什么？结果有何异同？能说明的问题是什么？ _引物

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二者结果相同。都能说明生物体外的特殊DNA复制的整个过程的扩增效率和溶解温度情况。
区别：
1、二者系统组成不同
荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。
2、二者原理不同
荧光定量PCR实时监测与DNA结合的荧光染料激发的荧光，普通OCR通过检测插入DNA中核算染料的量来测定PCR最终产物量。
3、二者反应要求不同
荧光定量PCR对扩增片段有较高的要求，一般为100-300bp，普通PCR可以扩增长点的片段。
4、二者应用不同
荧光定量PCR主要是用来定量分析和确定基因转录水平的，普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段，定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作，反之不行。
5、二者测量成本不同
定量PCR仪价格较为昂贵，普通的基因扩增仪(PCR仪)只能够定性地分析是否存在目标片段。但是价格要低很多，而且运行成本也要低很多。
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。
参考资料来源：百度百科-实时荧光定量PCR
参考资料来源：百度百科-PCR
PCR的全称是：多聚酶链反应,用俗话说就是人为地制造一个环境,使双链基因片段进行复制、扩增
目的基因：就是你想要扩增的基因片段
变性：是在热的环境下使双链解链,一般需要94摄氏度
引物：引导复制的开始,是一种RNA单链片段,能引导复制的起始位置
聚合酶：用的是Taq酶是在火山口找到的一种耐热的酶,在它的作用下以四种脱氧核苷酸（dNTP）为原料合成双链
延伸：通俗点说就是原来的模板链和新合成的单链组成一条新的双链的过程,延伸时间的长短、温度的高低会影响新双链的质量
PCR的大致过程
1、模板DNA
2、（第一轮循环）：模板DNA变性和引物复性
3、（第一轮循环）：引物延伸
4、（第二轮循环）：新合成的双链变性和引物复性
5、（第二轮循环）：引物延伸
……
如此往复,直至结束
之后可以泡个琼脂糖电泳看看扩增的情况,也可以测OD值,计算浓度
现在也有real time PCR,实时定量PCR,可以在间隔相等的时间测反应物的浓度,获得相对较准确的数据,比较简便.
总的来说,做分子生物学实验就是一项烧钱的活
1、如果有标准曲线，按照标准曲线计算；
2、一般都是相对量，则用deltadeltaCT方法来计算；
3、引物或探针降解：可通过PAGE电泳检测其完整性；
4、模板量不足：对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起；
5、看CT值是分析荧光定量PCR最直观的一个数据，CT值一般在35左右就失去参考价值了，平时我们实验室用BIODAI-PCR荧光定量法测得的扩增曲线的起跳值基本在30左右。
扩展资料：
PVR的循环参数：
1、预变性；
模板DNA完全变性与PCR酶的完全激活对PCR能否成功至关重要，加热时间参考试剂说明书。
2、变性步骤；
循环中一般95℃，30秒足以使各种靶DNA序列完全变性，可能的情况下可缩短该步骤时间。变性时间过长损害酶活性，过短靶序列变性不彻底，易造成扩增失败。
3、引物退火；
退火温度需要从多方面去决定，一般根据引物的Tm值为参考，根据扩增的长度适当下调作为退火温度。然后在此次实验基础上做出预估。退火温度对PCR的特异性有较大影响。
4、引物延伸；
引物延伸一般在72℃进行（Taq酶最适温度）。但在扩增长度较短且退火温度较高时，本步骤可省略延伸时间随扩增片段长短而定，一般推荐在1000bp以上，含Pfu及其衍生物的衍生设定为1min/kbp 。
5、循环数；
大多数PCR含25-35循环，过多易产生非特异扩增。
【实时荧光定量PCR与普通PCR的区别是什么？结果有何异同？能说明的问题是什么？】6、最后延伸；
在最后一个循环后，反应在72℃维持10-30分钟．使引物延伸完全，并使单链产物退火成双链。
参考资料来源：百度百科—实时荧光定量PCR