过氧化氢的灭菌原理是什么,外植体灭菌的原理?

雾化过氧化氢与汽化过氧化氢之间的区别:
1、原理不同: (1)汽化过氧化氢是将35%的过氧化氢液体通过加热至130摄氏度形成蒸汽,气相过氧化氢在空间中扩散 。经过曝露后,使用一种活性曝气装置将过氧化氢催化分解成氧气和水 。此汽化过氧化氢可以对细菌孢子达到6-log的杀灭率,包括艰难梭菌以及其他医院常见细菌,如MRSA,VRE,鲍氏不动杆菌以及病毒 。汽化过氧化氢灭菌后,通过对表面取样显示其可以根除艰难梭菌等医院常见病菌的病原体 。(2)过氧化氢干雾使用5%浓度的过氧化氢、50ppm的银离子以及50ppm正磷酸的混合溶液,用压力产生8-10微米的颗粒 。曝气后,干雾遗留在空间里被动分解 。过氧化氢干雾可以达到4-log的艰难梭菌孢子杀灭率,不能充分灭活 。过氧化氢干雾对于医院常见细菌的效力,如MRSA以及鲍氏不动杆菌,已经得到充分证实 。但对于结核杆菌的效力尚未确认 。
2、产生设备不同:汽化过氧化氢需要专门的汽化过氧化氢发生器;而雾化过氧化氢需要专门的雾化过氧化氢发生器 。
3、颗粒大小不同:雾化过氧化氢是把过氧化氢液体雾化为小颗粒状大小的液体,肉眼可见,而汽化过氧化氢则是通过闪蒸技术汽化过氧化氢成为更小微颗粒 。
4、灭活效力不同:一台汽化过氧化氢发生器的灭活效力优于两台雾化过氧化氢发生器,且更省时间 。

过氧化氢的灭菌原理是什么,外植体灭菌的原理?

文章插图
外植体灭菌的原理?
接种用的材料表面,常常附有多种多样的微生物,这些微生物一旦带进培养基,就会迅速滋生,使实验前功尽弃 。因此,材料在接种前必须进行灭菌 。灭菌时,既要将材料上附着的微生物杀死,同时又不能伤及材料 。因此,灭菌采用何种药剂,什么浓度,处理多长时间,均应根据材料对药剂的敏感情况仔细敲定 。


经常使用的灭菌剂有次氯酸钠、过氧化氢、漂白粉、溴水和低浓度的氯化汞等 。使用这些灭菌剂,都能起到表面杀菌的作用 。但氯化汞灭菌后,汞离子在材料上不易去掉,必须将材料用无菌水多清洗几次 。


外植体的灭菌工作应在接种室或接种箱内无菌的条件下进行 。


花药的灭菌


用于组织培养的花药,按小孢子发育时期要求,实际上大多没有成熟,花药外面有萼片、花瓣或颖片、稃片保护着,通常处于无菌状态 。所以一般只对整个花蕾或幼穗进行灭菌 。如茄(Solanum melongena L.)的花药,灭菌时先去掉花蕾的萼片,用70%酒精擦洗花瓣,然后将整个花蕾浸泡在饱和漂白粉上清液中10分钟,再经无菌水清洗2~3次,即可接种 。这一灭菌程序,也适用于其它植物花药的灭菌 。


果实及种子的灭菌


灭菌前,先将果实、种子用纯酒精迅速漂洗一下或将种子浸泡10分钟 。对于果实,一般再用2%的次氯酸钠溶液浸泡20~30分钟甚至几小时,持续时间视种皮硬度而定 。对用作胚或胚乳培养的种子,如种皮太硬,则在灭菌前先去掉外种皮,再用4~8%次氯酸钠溶液浸泡8~10分钟,用无菌水清洗后,即可剖出胚或胚乳进行接种 。


茎尖、茎段及叶片的灭菌


灭菌方法与花药的灭菌方法相同 。对于茎叶,因为暴露在空中,且生有毛或刺等附属物,所以灭菌前应该用自来水冲洗干净,用吸水纸将水吸干,再用70%酒精漂洗一下 。然后,根据材料的老、嫩和枝条的坚硬程度,用2~10%次氯酸钠溶液浸泡6~15分钟,用无菌水冲洗3次,用无菌纸吸干后进行接种 。


根和贮藏器官的消毒


【过氧化氢的灭菌原理是什么,外植体灭菌的原理?】这类材料大多埋于土中,材料上常有损伤及带有泥土 。灭菌比较困难 。灭菌前,要用自来水清洗,并用毛刷或毛笔轻轻刷洗去掉污物,吸干后用70%酒精漂洗一下,再用0.1~0.2%的氯化汞灭菌5~10分钟,或用6~8%次氯酸钠溶液浸5~15分钟,接着用无菌水清洗及用无菌纸吸干,然后进行接种 。