琼脂糖凝胶电泳原理及区别

【琼脂糖凝胶电泳原理及区别】
1琼脂糖凝胶电泳原理:琼脂糖疑胶具络,物质分子根据时间到阻力,大分子物质在跑时阻力大 。因此,在凝胶电泳中,通电颗粒的分离不仅在于净电荷的特性和数量,还在于分子的大小,大大提高了分辨率 。但由于其直径大于蛋白质,其分子筛对大多数蛋白质的影响并不重要,现在广泛应用于核酸的研究中 。琼脂糖凝胶电泳应以琼脂糖为适用介质 。其分析原理与其他支持物电泳的主要区别在于,它具有分子筛和电泳的多重功能 。
2核酸是两性电解质,其等电点为pH2-2.5、在常规电泳缓冲液中(pH约8.5),核酸分子带负电,在电场中向正级移动 。在琼脂糖疑胶中游泳时,核酸分子具有电荷效应和分子筛效应,但多为分子筛效应 。条状双链DNA琼脂糖疑胶中分子的转移速度和浓度DNA与大多数分子量相比,分子越多,阻力越大,在疑胶孔中移动的难度越大,因此转移速度越慢 。